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精子形态学检查

 

  精子形态学检查是为了了解正常精子与生理及病理范围内的变异精子所占的比例,是反映男性生育能力的一个重要指标。正常精子似蝌蚪状,由头、体、尾三部分构成。头部略扁,呈卵圆形,轮廓规则,顶体清楚,顶体帽覆盖头部表面的l/3以上,在精子头部前端呈透亮区。头长3—5um,宽2—3um,长宽比为1.5—2:1,长宽比值是判断精子形态是否正常的重要数据之一。体中段细长,不到头宽l/3,轮廓直而规则,与头纵轴成一直线,长约5—7um,宽lum。尾部细长,外观规则而不卷曲,一般长50—60um。HE染色顶体呈淡红色,核位于顶体基部,呈紫红色,尾部呈淡紫红色。改良巴氏染色,顶体呈淡绿色,核呈紫红色,尾部呈绿色。精子异常形态种类较多,有70种以上变异。实际分类是将精子分成头正常型(卵圆形头),不定型(不规则头),头逐渐变细型,大头型,小头型和未成熟型(发育未全的)。缺乏统一分类标准。

 

  精子涂片染色染色是分析精子形态的主要手段,正常精子和生理及病理范围内的变异精子也只能通过染色加以分析。常用的方法为涂片法,当精子计数<10×109/L时,应将精液离心500rpm/10min,取沉淀涂片。精子数>10×109/L时时,直接取l滴精液涂片,空气中自然干燥。精液涂片染色方法很多,可根据临床或研究需要自己选择。常用的有HE(苏木精-伊红)染色法或瑞-姬氏染色法,形态的特殊鉴别可用改良巴氏染色法。正常精液中异常精子应为10—15%,>20%为异常。异常精子的形态常与感染、外伤、雄激素变化或化学药物及遗传因素影响有关。生殖系统的非特异性感染,可导致尖头和不定形头精子比例增多。精索静脉曲张由于静脉回流不畅造成阴囊内温度过高和睾丸组织缺氧,可引起精子头部或体部肿胀或缺陷。服用激素或某些化学药品,精液中会出现不成熟的精子及其他生殖细胞和精子细胞体的胞质小滴。

 

  精液中细胞检查正常精液中有极少量的红细胞(偶见)和白细胞(<5/HPF),当生殖道炎症、结核、恶性肿瘤时,红、白细胞数可增高。精液常规检查白细胞是用新鲜精液直接涂片镜检判定结果。这种判定方法往往把生精细胞误认为自细胞,因此WHO推荐用正甲苯胺蓝过氧化物酶染色后镜检加以鉴别。1989年WHO公布用正甲苯胺蓝过氧化物酶染色,正常精液中白细胞数应<1.0×109/L,>1.0×109/L的不育患者称为白细胞精子症,主要见于附属腺炎症。

 

  生精细胞形态学检查  未成熟生精细胞是指各阶段发育不完全的精子细胞,胞体较大,不具有尾部,应注意与白细胞和上皮细胞鉴别。其操作方法是,待精液液化后,直接制片或事先处理后再制片,用瑞-姬氏染色或改良巴氏染色法进行染色后镜检,计数100个生精细胞进行形态分类和计数。


  (1)精原细胞  精原细胞分为3类型(Ad、Ap及 B型),Ad型精原细胞可能是精子发生的干细胞,与生精小管的管壁基膜相联;B型精原细胞常脱离管壁,游至管腔,随精液排出。胞体呈圆形,直径约12fAm,核居中央,核直径约6—7um,染色质呈疏松网状结构,通常在胞核边缘可见较深染的l—2个核微体(核仁)。由于精原细胞呈发育生长的过程,可见早期分裂相,形态多样。

 

  (2)初级精母细胞  由精原细胞分裂产生。初级精母细胞需经历前细丝期、休止期、细丝期、接合丝期、粗丝期和复丝期等分裂阶段。其形态可多种多样,胞体大小与核染色颗粒粗细、大小均不一致。常为胞体较大,一般直径为15—24um,浅染,胞核直径约8-9um,大多呈球形,染深蓝色。偶见染色质丝。

 

  (3)次级精母细胞  由初级精母细胞分裂而来,胞体较初级精母细胞小,早期次级精母细胞与初级精母细胞较难区别,一般直径约为12um,有时见双零,好似靖蜒的头与眼,一般胞核直径7um,染色质呈细网状,着色较浅。

 

  (4)精子细胞  体积较次级精母细胞更小,细胞核更小,着色较深,多呈球形或精子头的雏形,直径约8um,有时可见2—4个核,有时有空泡。其发育过程可分 Sa(高尔基期)、 Sb(头帽期)、 Sc(顶体期)、 Sd(成熟期)精子。1992年曹兴午等用瑞-姬氏染色法报告生育组精原细胞为1.9%,初级精母细胞为9.3%,次级精母细胞为7.5%,精子细胞为81.1%;不育组精原细胞为7.0%,初级精母细胞为9.2%,次级精母细胞为9.7%,精子细胞为74.0%。


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